源井生物始终致力于为科研工作者提供便捷、高质量的一站式干细胞基因编辑服务与高效、稳定、易用的干细胞产品解决方案,助力前沿科学研究与突破。目前,源井生物在人多能干细胞研究方向的相关服务与产品包括:
在广受认可的基因编辑服务与干细胞培养基系列之后,我们的产品矩阵再次扩充,全新推出两款新品,进一步丰富您的干细胞研究工具库:
新品亮相
继广受好评的基因编辑CRO服务和干细胞培养基系列之后,我们正式推出两款新品,进一步丰富您的干细胞研究工具库:
EZ-Stem™ 早期三胚层诱导试剂盒能够简单、快速、高效地验证人多能干细胞(人胚胎干细胞、人诱导多能干细胞)系向三个胚层(外胚层、中胚层和内胚层)分化的能力,适用于新建系或已建系的人多能干细胞系。该试剂盒采用预优化的完全培养基,并基于单层贴壁的分化方案,支持三胚层的平行定向分化,仅一周即可呈现出清晰且可重复的分化结果,是评估干细胞多能性的高效、可靠的研究利器。
人多能干细胞的多能性体现于其自我更新能力与多向分化能力,在高表达多能性基因的同时,具有分化为人类大部分谱系功能细胞的潜能,而这些细胞类型都源于胚胎发育早期的三个胚层(外胚层、中胚层和内胚层),因此早期三胚层分化能力的检测对于评估人多能干细胞的质量与功能至关重要,是衡量其“多能性”黄金标准之一,普遍用于:
b.经过基因编辑的人多能干细胞系的多能性验证;
c.人诱导多能干细胞(iPSCs)的质量检测与重编程效率评估。
图1. 外胚层分化效果检测(免疫荧光检测,上图;qPCR检测,下图)
图2. 中胚层分化效果检测(免疫荧光检测,左图;qPCR检测,右图)
图3. 内胚层分化效果检测(免疫荧光检测,左图;qPCR检测,右图)
定形内胚层(Definitive Endoderm,DE)是胚胎发育过程中的一个关键中间阶段,是生成所有内胚层谱系器官(胰腺、肠道、肺、肝等)的必经之路。然而,实验室中实现重复性高、纯度稳定、效率优异的分化过程仍然具有较大的挑战性,EZ-Stem™ 定形内胚层诱导试剂盒通过优化的成分配比与长时间稳定性测试,提供一种无血清、无动物成分的定形内胚层分化体系,产品包括预优化的基础培养基与补充剂,能够在3天内将人多能干细胞hPSCs(人胚胎干细胞hESCs、人诱导多能干细胞hiPSCs)高效分化为定形内胚层细胞(分化效率高达90%以上)。通过EZ-tem™ 定形内胚层诱导试剂盒制备的定形内胚层细胞能够特异性地高表达SOX17、FOXA2、CXCR4等早期内胚层标志基因,并能够用于后续内胚层谱系功能细胞(胰腺、肠道、肺、肝等)的进一步分化,从而为发育机制研究、疾病建模与药物筛选提供了一个强大的工具。
图4. 分化后定形内胚层细胞形态
图5. 分化终点特异性标志物检测(qPCR检测,左图;免疫荧光检测,右图)
图6. 不同人多能干细胞的DE分化效率
首先,EZ-Stem™ 早期三胚层诱导试剂盒中所包含的培养基产品是预配制的完全培养基,并在现有文献的配方中进行了优化,诱导产物谱系特异性高。另外,该产品的使用方式保证了客户在使用上的一致性和稳定性,且使用简易、快捷。
该试剂盒所包含产品属于终点检测试剂,未对下游分化或其他应用所需的细胞生成进行优化。对于外胚层、内胚层的产物,如下游分化实验对神经外胚层与定形内胚层的纯度要求不高,可酌情使用其分化产物进行后续实验;对于中胚层产物,由于中胚层各类型的谱系细胞分化路线相差较大,估不建议使用该产物进行中胚层谱系的下游分化或其他应用。
EZ-Stem™ 定形内胚层诱导试剂盒制备的定形内胚层细胞在分化效率与纯度上均高于EZ-Stem™ 早期三胚层诱导试剂盒中内胚层方向诱导所得到的分化产物,可达到90%以上,更加适用于下游内胚层谱系的进一步分化,而EZ-Stem™ 早期三胚层诱导试剂盒则一般应用于对细胞早期内胚层或定形内胚层分化能力的检测,其主要优势更倾向于检测的简易性和高效性。
基于核心成分的考虑,这两款试剂盒适用于目前大部分商品化干细胞培养基所培养的人多能干细胞。由于大部分产品的测试是在EZ-Stem™ 干细胞培养基的体系下进行的,因此,为了保证实验的效果和成功率,我们建议客户使用EZ-Stem™ 干细胞培养套装,以保证人多能干细胞长期维持培养的稳定性。