基因点突变细胞株(系)

通过核转染法将CRISPR/Cas9系统的gRNA载体（含Cas9）与携带目标点突变的Donor共转入细胞中，在gRNA和Cas9复合物造成靶位点DNA双链断裂后，细胞以Donor作为模板进行同源重组修复（HDR），将目标点突变重组到基因组靶位点。然后利用抗性完成药筛后进行单克隆筛选，通过靶位点扩增及测序验证筛选出成功实现靶位点突变的阳性克隆，最终交付阳性克隆与相关数据报告。

基因点突变细胞服务详情Point Mutation Cell Line Service Details

细胞类型	肿瘤细胞、常规细胞系、IPS/ES等各类细胞
方案类型	RNP法、质粒抗性法、单碱基编辑器、AAV-Donor法
交付成果	Cell Pool/阳性克隆
周期/价格	在线咨询添加官方微信号：18054268871（手机同号）

200+基因编辑成功细胞

呼吸系统

仓鼠肺细胞(V79)人咽鳞癌细胞(FaDu)人支气管上皮细胞(16HBE)人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)人非小细胞肺癌细胞(HCC827)人非小细胞肺癌细胞(NCI-H1299)人肺鳞癌细胞(NCI-H226)人肺鳞癌细胞(SK-MES-1)人肺癌细胞(NCI-H520)人肺癌细胞(Calu-1)人肺癌细胞(A549)

循环系统

小鼠成肌细胞(C2C12)人冠状动脉内皮细胞株(HCAEC)小鼠心肌细胞(HL-1)大鼠心肌细胞(H9C2)

内分泌系统

人乳腺癌细胞(MCF7)小鼠胰岛素瘤β细胞(NIT-1)人乳腺癌细胞(JIMT-1)人乳腺管癌细胞(T-47D)人原位胰腺腺癌细胞(BxPC-3)小鼠胰腺腺泡细胞(266-6)人前列腺癌细胞(VCaP)人胰腺癌细胞(MIA PaCa-2)小鼠髓样乳腺癌细胞(E0771)小鼠胰腺癌细胞(Pan02)人转移胰腺腺癌细胞(AsPC-1)人乳腺腺癌细胞(SK-BR-3)人胰腺癌细胞(PANC-1)小鼠乳腺癌细胞(4T1)人乳腺癌细胞(ZR-75-1)人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)

脑和神经系统

人胶质瘤细胞(U251MG)小鼠小胶质细胞(BV2)人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)小鼠颅顶前骨细胞亚克隆(MC3T3-E1 Subclone 14)人脑星形胶质母细胞瘤(U-87 MG)大鼠胶质瘤细胞(C6)小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)

血液，淋巴系统

人B淋巴瘤细胞(Su-DHL-4)弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY3)人弥漫大B淋巴瘤细胞(U2932)人急性非B非T淋巴细胞白血病(Reh)人慢性髓原白血病细胞(K-562)人白血病T淋巴细胞(Jurkat, Clone E6-1)大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)人单核细胞白血病细胞(THP-1)猪肺泡巨噬细胞(3D4/21)小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)

泌尿系统

小鼠前列腺癌细胞(RM-1)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12)远端肾单位细胞(Distal nephron cell line（JU4s）)狗肾细胞(MDCK)人前列腺癌细胞(22RV1)人胚肾细胞(293T)人胚肾细胞(HEK293)人膀胱移行细胞癌细胞(T24)人膀胱癌细胞(5637)人膀胱癌细胞(TCCSUP)

消化系统

人结肠腺癌细胞(LS174T)猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)人肝癌细胞(HepaRG)小鼠肝癌细胞(Hepa 1-6)小鼠肝癌细胞(H22)人肝癌细胞(SMMC-7721)人肾癌细胞(ACHN)非洲绿猴肾细胞(Vero)人肾透明细胞腺癌细胞(786-0)人食管鳞癌细胞(KYSE-30)人食管鳞癌细胞(KYSE-150)人胃腺癌细胞(AGS)人胃癌细胞(SGC-7901)人胃癌细胞(HGC-27)人肝胆管癌细胞(RBE)人肝癌细胞(HuH-7)人肝癌细胞(Hep3B)人肝癌细胞(Hep G2)人正常肝细胞(L-02)人结肠腺癌肺转移细胞(T84)人结直肠腺癌细胞(Caco-2)人结直肠腺癌细胞(NCI-H716)人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1)小鼠结肠癌细胞(CT26.WT)小鼠结肠癌细胞(MC38)人结肠癌细胞(COLO 205)人结肠腺癌细胞(RKO)人结肠癌细胞(HT-29)人结肠癌细胞(SW620)人结肠癌细胞(SW480)人结肠癌细胞株(HCT 116)

骨、关节、软组织、皮肤系统

小鼠骨样细胞(MLO-Y4)成釉细胞瘤(hTERT-AM)小鼠鳞状细胞癌细胞(SCC7)小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/0-Ag14)人皮肤鳞癌细胞(A431)小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)人黑色素瘤细胞(M14)人恶性黑色素瘤细胞(A-375)人纤维肉瘤(HT-1080)人骨肉瘤细胞(U-2 OS)人骨肉瘤细胞(MG-63)

眼耳鼻喉口腔系统

人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)人眼脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1)人口腔鳞癌细胞(HSC3)人鼻咽癌细胞(C666-1)鼻咽癌细胞(CNE2Z)人鼻咽癌细胞(NPC-43)大鼠穆勒细胞(rmc-1)

生殖系统

人卵巢癌细胞(OVCAR-3)人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo)人卵巢腺癌细胞(CAOV3)小鼠睾丸间质细胞(TM3)小鼠促性腺激素腺瘤细胞(Lbetat2)人卵巢癌细胞(SK-OV-3)仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1)小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)人宫颈癌细胞(HeLa 229)人宫颈癌细胞(HeLa)

干细胞

人胚胎干细胞(H9)人胚胎干细胞(H1)诱导型多能干细胞 ipsc( ipsc)

CRISPR-U™技术优势CRISPR-U™ technical advantages

更高的基因切割效率与同源重组效率，基因编辑效率提升10-20倍

大量成功案例，在超200种细胞中成功实现超5000次基因编辑

应用广泛，轻松实现基因敲除/点突变/敲入

承诺项目失败全额退款，成功保障安全无忧

点突变方案Point mutation Strategy

服务流程及质量控制Work Flow and Validation

应用案例Case Study

PSEN1基因A79V突变可引起阿尔茨海默症。研究表明，将阿尔茨海默症患者的体细胞诱导为多能干细胞（iPSC），然后通过用野生型序列替换点突变序列，修正突变的基因。通过研究患者的iPSC和修正后的iPSC，可以得知该突变对细胞表型的影响，从而深入研究该突变的病理性作用。

用于修复A79V-hiPSC点突变的gRNA序列和ssODN。
A）突变位点附近的基因组序列：红色的T是需要被修正的核苷酸；黄色的是sgRNA识别位点，加粗的AA是Cas9的切割位点；粉红色的是正反向引物。
B） Donor oligo序列, 绿色的C是修正后的核苷酸。

iPSC中PSEN1基因的序列分析
A_点突变修正后的杂合子测序结果。
B_ 点突变修正后的纯合子测序结果（T>C）。

Reference：

Fukuda, N., Senga, Y., & Honda, S. (2019). Anxa2‐and Ctsd‐knockout CHO cell lines to diminish the risk of contamination with host cell proteins. Biotechnology progress, e2820.