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CRISPR-iScreen™ Cell Pool & 病毒

还原真实生物环境,助力科研转化突破

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CRISPR文库Cell Pool&病毒

CRISPR 文库细胞(Cell Pool) 是利用含有多种 sgRNA 的 CRISPR病毒文库 ,以低感染复数(MOI)感染目标细胞,从而构建出携带不同 sgRNA、具有多样化基因敲除背景的细胞群体。通过施加特定筛选压力(如药物处理、传代培养、流式分选等),可使具备特定表型的细胞群体富集或减少,结合高通量测序(NGS)分析,能够系统性鉴定与表型相关的关键基因。该技术广泛应用于:药物耐药机制探索、肿瘤转移与侵袭研究、免疫互作与调控机制解析、全基因组或定制化靶点筛选等。

源井技术优势

丰富的现货资源

· 400+现货文库细胞,涵盖多种肿瘤和常用细胞系。 · 周期短,快至1周内交付,节省前期构建时间。

高滴度病毒,覆盖均一

· 病毒滴度高,活病毒滴度1*10^8TU/mL以上。 · sgRNA 分布均一,确保筛选实验可重复性

高细胞覆盖度、低MOI感染

严格控制病毒感染效率,使用更低的病毒感染MOI以及更多的野生型细胞进行感染,确保尽可能多的细胞只进入一条sgRNA,保障文库细胞的质量,确保细胞经多次传代后仍能保持较高的sgRNA覆盖率。

iScreenAnlys™文库分析平台

· 文库细胞均经过冻存复苏、支原体检测、细菌检测 · NGS测序验证sgRNA 覆盖率高达≥99% · 确保细胞传代后仍具备稳定的gRNA 分布

灵活服务模式

· 提供现货及定制化服务 · 满足从快速实验启动到深度定制研究的多样化需求

技术服务路线

借助多种压力条件与富集手段的正交搭配,源井生物打造了灵活多元的功能筛选体系。客户可根据具体科研目标,自主定制“施加压力”与“富集策略”,实现更精准的功能挖掘。

gRNA文库设计与质粒构建

慢病毒包装与滴度检测

MOI摸索与文库感染

抗生素筛选 & Cell Pool建立

NGS测序与数据分析

技术服务详情

CRISPR文库病毒

文库病毒现货

文库质粒扩增完成后,进行慢病毒包装、病毒浓缩以及滴度检测,确保交付病毒滴度大于1*10^8TU/mL。

实验周期

1周

交付内容

相应规格的文库病毒,以及病毒COA质检报告。

定制文库病毒

从头设计sgRNA,并构建定制化的文库质粒,经文库质粒扩增、NSG质检后,进行慢病毒包装、病毒浓缩以及滴度检测,确保交付病毒滴度大于1*10^8TU/mL。

实验周期

6-9周

交付内容

相应规格的文库病毒、病毒COA质检报告以及定制文库质粒NGS测序报告。

CRISPR文库Cell Pool

文库细胞现货

已构建完成的现货文库细胞,经复苏验证、菌检、支原体检测以及NGS测序后,确保文库细胞合格后交付。

实验周期

1周

交付内容

300x或500x以上覆盖度的文库细胞,NGS测序报告

文库细胞期货

使用现货文库病毒,对特定细胞进行MOI摸索、文库病毒感染、细胞药筛以及NGS测序。

实验周期

6-9周

交付内容

300x或500x以上覆盖度的文库细胞,NGS测序报告

文库细胞定制

从头设计sgRNA,并构建定制化的文库质粒以及慢病毒包装,再通过MOI摸索、文库病毒感染、细胞药筛以及NGS测序质检等步骤构建全新的定制化文库细胞

实验周期

11-13周

交付内容

300x或500x以上覆盖度的文库细胞,NGS测序报告

应用案例

1. 文库病毒包装检测

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文库病毒检测COA
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文库病毒检测溶解曲线

2. 文库病毒感染MOI摸索

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设置多个不同的MOI感染梯度进行感染测试,并计算对应的细胞感染效率,选择感染效率约30%的MOI作为文库病毒感染条件
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不同的感染效率下,文库细胞进去多条sgRNA的比例(图片源于文献)
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不同的细胞覆盖度感染文库细胞传代后的sgRNA覆盖率差异(图片源于文献)

3. 文库细胞图片

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5637文库细胞
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A549文库细胞
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UM-UC-3文库细胞

4. 文库细胞NGS测序检验sgRNA覆盖率

1.定制文库细胞NGS测序结果

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2.全基因组敲除文库细胞测序结果

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