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Luc报告基因细胞系

报告基因细胞系是将特定信号通路响应元件与报告基因偶联构建的工程化细胞模型。目标信号通路激活后,响应元件介导报告基因转录表达,通过测定报告蛋白活性或荧光强度,可对信号通路活性进行定量分析。

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Luc报告基因细胞系

报告基因细胞系的作用依托报告基因系统原理实现:将特定信号通路响应元件与报告基因进行串联,目标信号通路活化后,响应元件会启动报告基因表达,借助测定报告蛋白活性或是荧光强度,就能对通路活性开展定量分析。

依托上诉原理,报告基因细胞系借助基因工程技术,将报告基因(如Luciferin等)稳定整合至宿主细胞基因组,实现对胞内信号变化与基因转录活性的实时定量监测。凭借定量精准、灵敏度优异的核心优势,该细胞系被普遍应用于信号通路研究、药物筛选、靶点验证、受体活性检测及分子机制探究等多项科研工作。

应用场景
信号通路机制研究
活体成像与体内示踪
高通量药物筛选与药效评价
受体-配体相互作用研究
基因表达调控与表现遗传研究

Luc报告基因细胞系服务详情

细胞类型

肿瘤细胞、永生化细胞系等

编辑类型

慢病毒法

交付形式

1.活细胞/冻存细胞(可选); 2.完整质检报告;

质量控制QC

功能活性检测结果(信号通路激活剂或抑制剂调控后的剂量反应曲线等关键数据)

周期/价格

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其他质控

通过STR鉴定,细菌、真菌、支原体检测;通过细胞复苏活率检测;

*交付的所有实验成果及产物仅限于科研使用,不可适用于诊断、治疗、临床及其它用途。
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源井技术优势

高效精准的基因编辑平台
依托EZ-editor™技术平台以及丰富的基因编辑与基因表达调控经验,确保响应元件整合的高效性与准确性。
高效精准的基因编辑平台
广泛的细胞类型覆盖
已成功构建上万例基因编辑细胞系,涵盖多种常见及难转染细胞类型,可满足不同定制需求。
广泛的细胞类型覆盖
严格的无菌质控体系
检测75种常见及罕见支原体、灵敏度高,确保细胞系无污染、批次间稳定性好。
严格的无菌质控体系
完善的功能验证平台
配备功能齐全的多样化表型分析平台,全面支持报告基因细胞系的功能活性验证。
完善的功能验证平台

服务流程及质量控制

慢病毒载体构建

慢病毒转导

抗性筛选获得稳定多克隆细胞池

功能活性验证

产品交付

应用案例

1. Tumor suppressor protein p53 is a regulator of NF-κB repression by the glucocorticoid receptor

使用的信号通路报告细胞系:
使用稳定表达 NF-κB 荧光素酶报告基因的细胞系,包括:
293T 细胞:稳定转染 3x NF-κB-luc 报告基因。
THP-1 细胞(人单核细胞系):通过慢病毒转染 5x NF-κB-luc-mPGK-mCherry 报告基因。
应用:
利用这些报告细胞系,结合 siRNA 高通量筛选,寻找影响糖皮质激素受体(GR)抑制 NF-κB 活性的新基因,从中验证了 p53 在该过程中是 GR 抑制 NF-κB 的关键调控因子,为理解肿瘤微环境中炎症与糖皮质激素抵抗提供了新的分子机制。
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图1.NF-κB 荧光素酶报告细胞系的工作示意图

2. Tumor suppressor protein p53 is a regulator of NF-κB repression by the glucocorticoid receptor

使用的信号通路报告细胞系:
构建了稳定转染 ARE(抗氧化反应元件)-荧光素酶报告基因的人乳腺癌 MCF7 衍生细胞系,命名为 AREc32。报告基因含有 8 个串联重复的 ARE 核心序列(来自大鼠 GSTA2 和小鼠 gsta1 启动子),上游为 SV40 启动子,驱动萤火虫荧光素酶表达。该细胞系对 Nrf2 激活剂(如 t-BHQ、sulforaphane)敏感,诱导倍数为 10–50 倍。
应用:
用于筛选和验证 Nrf2-ARE 通路的激活剂,包括已知的抗氧化剂、亲电体及部分抗癌药物。
研究了细胞氧化还原状态(如 GSH 耗竭、抗氧化剂处理)对 ARE 活性的影响。
检测了多种化疗药物(如顺铂、美法仑、卡莫司汀、氯ambucil 等)对 ARE 的诱导作用,并观察 BSO(GSH 合成抑制剂)预处理是否增强这种诱导。
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图2. Nrf2-ARE荧光素酶报告细胞系的构建与鉴定

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