Luc报告基因细胞系_稳定细胞株_信号调控细胞系模型

Luc报告基因细胞系

报告基因细胞系的作用基于报告基因系统原理实现：将特定信号通路的响应元件与报告基因进行重组构建。当目标信号通路被激活时，相应的转录因子结合响应元件并驱动报告基因表达，从而通过检测报告蛋白的活性或荧光/发光信号强度，对通路活性进行定量分析。

基于上述原理，报告基因细胞系通常采用基因工程技术，将报告基因（如荧光素酶 luciferase 等）稳定整合至宿主细胞基因组中，实现对细胞内信号变化及基因转录活性的实时、动态监测。凭借定量准确、灵敏度高、重复性好等优势，该类细胞系被广泛应用于信号通路研究、药物筛选、靶点验证、受体活性检测以及分子机制解析等多种生物医学研究领域。

应用场景

信号通路机制研究

活体成像与体内示踪

高通量药物筛选与药效评价

受体-配体相互作用研究

基因表达调控与表现遗传研究

Luciferase（Luc）稳转细胞系

慢病毒转导技术构建，可稳定表达萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, Luc）

300+Luc稳转细胞系|￥1999起|快至1周

Luc报告基因细胞系服务详情

细胞类型

肿瘤细胞、永生化细胞系等

编辑类型

慢病毒法

交付形式

1.活细胞/冻存细胞（可选）; 2.完整质检报告;

质量控制QC

功能活性检测结果（信号通路激活剂或抑制剂调控后的剂量反应曲线等关键数据）

周期/价格

详情请咨询

其他质控

通过STR鉴定，细菌、真菌、支原体检测；通过细胞复苏活率检测；

*交付的所有实验成果及产物仅限于科研使用，不可适用于诊断、治疗、临床及其它用途。

在线咨询

源井技术优势

高效精准的基因编辑平台

依托EZ-editor™技术平台以及丰富的基因编辑与基因表达调控经验，确保响应元件整合的高效性与准确性。

广泛的细胞类型覆盖

已成功构建上万例基因编辑细胞系，涵盖多种常见及难转染细胞类型，可满足不同定制需求。

严格的无菌质控体系

检测75种常见及罕见支原体、灵敏度高，确保细胞系无污染、批次间稳定性好。

完善的功能验证平台

配备功能齐全的多样化表型分析平台，全面支持报告基因细胞系的功能活性验证。

服务流程及质量控制

慢病毒载体构建

慢病毒转导

抗性筛选获得稳定多克隆细胞池

功能活性验证

产品交付

应用案例

1. Tumor suppressor protein p53 is a regulator of NF-κB repression by the glucocorticoid receptor

使用的信号通路报告细胞系：

使用稳定表达 NF-κB 荧光素酶报告基因的细胞系，包括：

293T 细胞：稳定转染 3x NF-κB-luc 报告基因。

THP-1 细胞（人单核细胞系）：通过慢病毒转染 5x NF-κB-luc-mPGK-mCherry 报告基因。

应用：

利用这些报告细胞系，结合 siRNA 高通量筛选，寻找影响糖皮质激素受体（GR）抑制 NF-κB 活性的新基因，从中验证了 p53 在该过程中是 GR 抑制 NF-κB 的关键调控因子，为理解肿瘤微环境中炎症与糖皮质激素抵抗提供了新的分子机制。

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图1.NF-κB 荧光素酶报告细胞系的工作示意图

2. Generation of a Stable Antioxidant Response Element-Driven Reporter Gene Cell Line and Its Use to Show Redox-Dependent Activation of Nrf2 by Cancer Chemotherapeutic Agents

使用的信号通路报告细胞系：

构建了稳定转染 ARE（抗氧化反应元件）-荧光素酶报告基因的人乳腺癌 MCF7 衍生细胞系，命名为 AREc32。报告基因含有 8 个串联重复的 ARE 核心序列（来自大鼠 GSTA2 和小鼠 gsta1 启动子），上游为 SV40 启动子，驱动萤火虫荧光素酶表达。该细胞系对 Nrf2 激活剂（如 t-BHQ、sulforaphane）敏感，诱导倍数为 10–50 倍。

应用：

用于筛选和验证 Nrf2-ARE 通路的激活剂，包括已知的抗氧化剂、亲电体及部分抗癌药物。

研究了细胞氧化还原状态（如 GSH 耗竭、抗氧化剂处理）对 ARE 活性的影响。

检测了多种化疗药物（如顺铂、美法仑、卡莫司汀、氯ambucil 等）对 ARE 的诱导作用，并观察 BSO（GSH 合成抑制剂）预处理是否增强这种诱导。

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图2. Nrf2-ARE荧光素酶报告细胞系的构建与鉴定

FAQs

1. 什么是报告基因细胞系？

报告基因细胞系是通过基因工程手段将特定信号通路的响应元件与可检测的报告基因（如萤火虫荧光素酶Firefly luciferase、Renilla荧光素酶、荧光蛋白等）重组，引入宿主细胞中并稳定表达而构建的细胞模型。当相应通路被激活时，对应的转录因子结合响应元件并驱动报告基因表达，从而通过检测报告蛋白产生的光信号或荧光强度，实现对通路活性或基因表达水平的实时、动态监测与定量分析。例如，将NF-κB应答元件与萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）基因偶联，可获得稳定的NF-κB报告细胞系，用于筛选调控NF-κB通路的化合物。基于该原理，报告基因细胞系可精确反映特定信号途径或基因启动子的活性动态。

2. 报告基因细胞系主要应用于哪些研究？

Luc报告基因细胞系被广泛应用于信号通路研究、高通量药物筛选、基因表达调控及启动子分析、毒性评估及体内成像与示踪等领域。

3. 常见的报告基因有哪些？

报告基因类型多样，常见有萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)、海肾荧光素酶(Renilla)、Gaussia/GluLuc荧光素酶等发光酶，以及绿色荧光蛋白(GFP)等荧光蛋白、β-半乳糖苷酶(lacZ)、分泌型碱性磷酸酶(SEAP)等。

荧光素酶是酶促发光报告基因，其催化底物（荧光素）氧化产生光子，无需激发光源且反应速率快，绝大多数哺乳细胞不表达内源荧光素酶，因此背景低、灵敏度高、动态范围宽。荧光蛋白如GFP无需底物、可在活细胞中实时成像，但受光漂白和自发荧光干扰限制。信号放大机制依赖于报告蛋白的酶催化性质：一个报告分子催化多个底物分子产生累积信号，大大放大了目标信号。通常实验中还会使用双报告系统（dual-reporter），即在实验报告基因（如Firefly luc）同时转染内参报告基因（如Renilla luc），利用后者校正转染效率或细胞活性差异。

4. luc报告基因细胞系质量控制与交付标准？

源井生物的Luc报告细胞系交付应符合严格的质量标准，包括：

细胞系鉴定：对所有人源/鼠源细胞系进行STR鉴定，确保细胞身份可追溯。并交付STR鉴定报告。
支原体检测：所有细胞均经过75种支原体、细菌、真菌等检测，且结果均为阴性。并可以提供鉴定报告。
细胞均通过功能活性检测。并提供信号通路激活剂或抑制剂调控后的剂量反应曲线等关键数据。

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