作为专注于基因编辑细胞领域的企业,源井生物凭借独家红棉基因编辑系统和CRISPR-U™基因编辑专利技术,历经2年,成功研发UBI-001类单倍体细胞系,这让我们拥有了稳定地批量化提供优质KO细胞裂解液的能力。
贴壁生长,增殖快易转染,单克隆形成力强。
类单倍体特征,保证超高敲除效率,无限逼近100%。
抗体作为强大的诊断与研究工具,它的质量问题一直被全球的科研人员紧密关注着,2003年Human Protein Atlas(HPA)计划中,研究人员们对来自29家供应商的9000多种抗体(包括单抗和多抗)进行了WB和IHC的验证,发现有49%的抗体完全无效,而仅有7%的抗体被证明是完全有效且拥有前后实验一致性。据统计,2016年前全球每年由于使用缺乏验证的抗体而造成的研究经费损失约为8亿美元。至今,抗体的交叉反应性与变异性所带来的“抗体危机”每年仍旧在导致大量的研究经费损失。
常用的抗体验证方法有WB、IHC、肽阵列和蛋白质阵列等等,但它们都存在或多或少的缺点,比如操作耗时,无法高通量验证、难以定量和难以标准化等,这就意味着一种抗体可能在一种验证方法中表现良好,但在另一种方法中却完全失败。所以仅仅采用传统验证方法并不能有效地保证这个抗体中的特异性,许多抗体公司为向消费者证明自身抗体的质量,都在积极寻找新的代替方法。
据报道,某知名抗体公司在2014年开始尝试采用siRNA技术抑制目标蛋白表达,来进行抗体产品的特异性验证。然而到目前为止,在上万种产品里只有几十种抗体进行了siRNA验证,不难看出siRNA敲低模型这一验证方法的效率并不高。
选择一种高效准确的抗体验证方法不仅能有效保障抗体质量,能显著提升抗体公司的企业竞争力与品牌形象,因此许多抗体公司都在寻找更好的验证方法。全球抗体龙头公司Abcam在2019年率先推出一系列使用KO细胞验证过的抗体,同时也淘汰了上千种验证不通过的抗体,一举革新高质量抗体的标准,开启了抗体验证“金标准”之旅。
KO细胞验证抗体特异性凭借其独有的优势,已成为抗体验证“金标准”。下表是KO细胞模型和siRNA敲低模型的技术优劣对比:
检测方法 | 优点 | 缺点 |
---|---|---|
KO细胞模型(单克隆) | DNA水平敲除,目标蛋白完全不表达,抗体验证的“金标准”; 最适于抗体特异性验证,是完美的阴性对照; 可用于大规模的批量化抗体筛选。 | 某些细胞致死、凋亡基因难以构建敲除细胞系; 成本相对较高,批量化生产具备一定难度。 |
KO细胞模型(pool) | DNA水平敲除,导致目标蛋白表达下调,非常适于抗体验证; 是抗体特异性验证强有说服力的阴性对照; 适用于大规模的批量化抗体筛选。 | 某些细胞致死、凋亡基因难以构建敲除细胞系; 敲除不彻底。 |
siRNA敲低模型 | RNA水平敲低,导致目标蛋白表达下调,可用于抗体验证; 较为适合抗体特异性验证,传统的阴性对照; 适用于大规模的批量化抗体筛选。 | 某些细胞致死、凋亡基因难以构建敲低细胞系; RNA水平敲低,目标蛋白含量下调情况难以调控; SiRNA效率不稳定,敲低不彻底; 非DNA水平敲低,说服力不够。 |
作为专注于基因编辑细胞领域的企业,源井生物凭借独家红棉基因编辑系统和CRISPR-U™基因编辑专利技术,历经2年,成功研发UBI-001类单倍体细胞系,这让我们拥有了稳定地批量化提供优质KO细胞裂解液的能力。
贴壁生长,增殖快易转染,单克隆形成力强。
类单倍体特征,保证超高敲除效率,无限逼近100%。
源井生物拥有超12年基因编辑经验的专家团队,至今已成功在超100种细胞中敲除了超5000例基因,并成功构建了独家KO细胞库与gRNA载体库,覆盖10大研究领域、8大信号通路、40种疾病、超1300种基因。目前预计源井生物KO裂解液年产能将超万个。
源井生物独家智能数据处理中心——红棉CRISPR基因编辑系统可批量化自动生成基因敲除方案,奠定了裂解液的批量化智能生产的基础。
源井生物独家技术专利CRISPR-U™,较于传统CRISPR/Cas9技术,切割效率高出了10-20倍,为优质裂解液的生产提供了技术保障。
源井生物的EZ-editor™系列产品与生信工具,不仅大大简化了KO裂解液的制备流程,还进一步提高了细胞转染率与单克隆形成率,有效缩减了至少25%的服务与生产周期。
EZ-editor™ 系列产品是由源井生物专家团队创新研发的基因编辑系列创新产品,包括细胞系、培养基、试剂盒、gRNA载体、慢病毒、KO细胞裂解液六大产品线,全面覆盖基因编辑实验流程,旨在简化实验流程,显著提高基因编辑效率,其中EZ-editor™KO细胞裂解液将成为未来抗体验证热潮的关键词!