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慢病毒包装服务

慢病毒（Lentivirus）包装所用载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷1型病毒）为基础，使用疱疹病毒VSVG 外壳蛋白发展起来的工具载体。由于其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代，属于假型病毒。慢病毒具有感染谱广泛特点，并且可以有效感染分裂和非分裂细胞。一经感染宿主细胞，慢病毒即利用反转录酶将其RNA转录成双链DNA，随后永久的整合到宿主细胞的染色体中，实现长时间稳定表达。此外，慢病毒免疫原性低，不易造成免疫反应，所以现在慢病毒系统除了被广泛应用到各种细胞系的基因敲除/敲入、基因过表达、RNA干扰、microRNA研究，还大量应用于活体动物实验中。

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慢病毒包装服务详情 Lentivirus Packaging Service Details

基因敲除慢病毒 Knockout lentivirus

源井生物构建慢病毒敲除载体并包装为慢病毒，细胞感染慢病毒后，可稳定表达gRNA和Cas9蛋白，达到敲除靶基因的目的。在线咨询

基因敲除慢病毒载体选择:

YKO系列载体	载体名称	荧光抗性
慢病毒YKO系列载体	YKO-LV001-single-gRNA	EGFP/mCherry可选,Puro/Neo可选
慢病毒YKO系列载体	YKO-LV001-dual-gRNA	EGFP/mCherry可选,Puro/Neo可选
慢病毒Cas9载体	YCas-LV001	Puro
慢病毒Cas9载体	YCas-LV002	Hygro

Cas9蛋白长达4kb，受慢病毒外源插入片段限制，通常将gRNA与Cas9分开包装慢病毒，再使用2种慢病毒共同感染宿主细胞。

基因表达慢病毒 Expression lentivirus

慢病毒具有广谱的感染性，无论是分裂细胞或非分裂细胞，都可以通过构建慢病毒基因表达载体且包装为慢病毒，再用慢病毒感染宿主细胞，利用病毒载体携带的抗药性进行药物筛选，从而获得稳定表达目的基因的细胞株。源井生物独有的病毒分级纯化工艺，满足客户从永生化细胞到原代细胞和干细胞，到动物体内水平等不同实验需求。在线咨询

基因表达慢病毒载体选择:

YOE系列载体	载体名称	荧光抗性
慢病毒YOE系列载体	YOE-LV001	EGFP/Puro
	YOE-LV002	mCherry/Puro
	YOE-LV003	EGFP/Neo
	YOE-LV004	mCherry/Neo
	YOE-LV005	Puro
	YOE-LV006	EGFP
	YOE-LV007	mCherry
	YOE-LV008	Luciferase/Puro

基因干扰慢病毒 Knockdown lentivirus

源井生物通过构建慢病毒干扰载体并包装为慢病毒。使用慢病毒感染宿主细胞后，可利用病毒载体携带的抗药性进行药筛，从而获得稳定干扰目的基因的细胞株。源井生物独有的病毒分级纯化工艺，满足客户从各种细胞（包括永生化细胞、原代细胞和干细胞），到动物体内水平等不同实验需求。在线咨询

基因干扰慢病毒载体选择：

YSH系列载体	载体名称	荧光抗性
慢病毒YSH系列载体	YSH-LV001-shRNA	EGFP/Puro
	YSH-LV002-shRNA	mCherry/Puro
	YSH-LV003-shRNA	EGFP/Neo
	YSH-LV005-shRNA	EGFP/Hygro
	YSH-LV004-shRNA	mCherry/Neo
	YSH-LV006-shRNA	Puro
	YSH-LV007-shRNA	EGFP
	YSH-LV008-shRNA	mCherry
	YSH-LV009-shRNA	Luciferase/Puro

产品规格 Product Specs

规格	交付标准	应用	周期	价格
标准规格病毒	1*10^8 TU	用于细胞转导	2-3周	在线咨询添加官方微信号： 18054268871（手机同号）
大包装规格病毒	1*10^9 TU	用于细胞转导	2-3周
纯化病毒	1*10^9 TU	用于体内注射	2-3周

服务流程及质量控制：

三种病毒的比对:

类型	重组慢病毒	重组腺病毒	重组腺相关病毒
来源	HIV-1	5型腺病毒	AAV2
基因组	两条线性的、连续的单链 RNA	一条线性的、连续的双链DNA	一条线性的、连续的单链DNA
基因组⼤小	野⽣生病毒：约9.2 kb	野⽣生病毒：约36 kb	野⽣生病毒：约4.7 kb
基因表达时间	长时间稳定表达	短暂表达	长时间表达
整合到细胞基因组	是	否	低频整合
免疫原性	低	高	很低
包装能⼒	约6.4 kb	约8.3 kb	约4.7 kb
优点	· 应用范围广； · 转导效率高； · 稳定遗传。	· 转导效率高； · 可携带大片段目的基因； · 可扩增病毒。	· 免疫原性低； · 安全性高； · 有组织特异性亲和能力。

有关慢病毒的FAQ，点击查看

·有关慢病毒的FAQ:

1、病毒转导至细胞后多久才会表达？

Lentivirus表达时间较长，但在一般代谢较旺盛的细胞（如293T，HEK293等）上，病毒转导24小时后可以观察到荧光；代谢比较缓慢的细胞（如原代培养细胞，神经干细胞，胚胎干细胞等）荧光蛋白表达时间较长，转导后72-96小时甚至更长时间才可以观察到荧光。转导后的细胞可以连续培养一周，通过观察荧光的表达时间和表达强度来确定病毒对目的细胞的转导情况。

2、慢病毒对目的细胞的转导效率很低，如何提高病毒的转导效率？

确保转导之前细胞处于良好的生长状态；可以使用易感细胞如293T进行滴度测试，验证病毒液滴度是否出现大幅下降；适当提高病毒转导的MOI值和延长转导时间。

3、慢病毒转导后，细胞状态很差甚至出现大量死亡，如何解决？

转导前细胞状态不佳，加入病毒量太大，病毒携带的目的基因含有细胞毒性均有可能导致目的细胞状态异常，解决方法主要有：
（1）稳定转导前细胞状态；
（2）降低病毒加入量，降低MOI值，验证目的基因的细胞毒性；
（3）转导6小时后观察细胞，如细胞状态出现异常时更换新鲜培养基，若无则24小时后更换。