基因敲除细胞

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基因敲除细胞系

敲除细胞作为重要的研究模型,广泛应用于探究基因功能、疾病机制和药物靶点筛选。通过模拟基因缺失对细胞行为的影响,可以揭示特定基因在生物学过程中的作用以及它们在疾病发展中的关键性。

基于CRISPR-U™技术,源井生物根据不同细胞特点选择适宜的转染方法(电转法或病毒法),将gRNA和Cas9转入细胞中,然后进行单克隆筛选,通过靶位点扩增及测序验证筛选出成功敲除的阳性克隆,最终交付纯合子细胞株与相关数据报告。

敲除细胞 敲除细胞

CRISPR-U™创新技术

CRISPR-U™是源井生物针对细胞系基因编辑自主研发的技术(基于CRISPR/Cas9),包括基于细胞基因组特性设计gRNA的独特算法、针对上千种细胞系不同基因编辑参数的摸索方法、精准检测Cell Pool编辑效率的方法、单克隆形成率提升的方法以及高通量鉴定微量细胞基因型的方法。相较于传统方法,源井生物CRISPR-U™技术可将细胞基因编辑效率提升10-20倍。
 
创新技术,基因编辑效率提升10-20倍
快速准确鉴别,提前4周筛到阳性克隆 快速准确鉴别,提前
4周筛到阳性克隆
超过300种细胞实现基因编辑,成功案例超6000个 超过300种细胞实现基因
编辑,成功案例超6000个
不成功不收费,保障项目安全无忧 不成功不收费,
保障项目安全无忧

基因敲除细胞系:如何设计gRNA高效KO,以及避免蛋白残留 >>

基因敲除细胞服务详情

细胞类型: 肿瘤细胞、永生化细胞系 细胞类型: Cell Pool/纯合子克隆
服务类型: 单基因/多基因敲除 周期: 快至4周,极速构建
细胞类型: 肿瘤细胞、永生化细胞系
细胞类型: Cell Pool/纯合子克隆
服务类型: 单基因/多基因敲除
周期: 快至4周,极速构建

基因敲除细胞的应用 >>

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300+ 基因编辑成功细胞

呼吸系统
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仓鼠肺细胞(V79) 人咽鳞癌细胞(FaDu) 人支气管上皮细胞(16HBE) 人正常肺上皮细胞(BEAS-2B) 人非小细胞肺癌细胞(HCC827) 人非小细胞肺癌细胞(NCI-H1299) 人肺鳞癌细胞(NCI-H226) 人肺鳞癌细胞(SK-MES-1) 人肺癌细胞(NCI-H520) 人肺癌细胞(Calu-1) 人肺癌细胞(A549)
循环系统
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小鼠成肌细胞(C2C12) 人冠状动脉内皮细胞株(HCAEC) 小鼠心肌细胞(HL-1) 大鼠心肌细胞(H9C2) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)
内分泌系统
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人乳腺癌细胞(MCF7) 小鼠胰岛素瘤β细胞(NIT-1) 人乳腺癌细胞(JIMT-1) 人乳腺管癌细胞(T-47D) 人原位胰腺腺癌细胞(BxPC-3) 小鼠胰腺腺泡细胞(266-6) 人前列腺癌细胞(VCaP) 人胰腺癌细胞(MIA PaCa-2) 小鼠髓样乳腺癌细胞(E0771) 小鼠胰腺癌细胞(Pan02) 人转移胰腺腺癌细胞(AsPC-1) 人乳腺腺癌细胞(SK-BR-3) 人胰腺癌细胞(PANC-1) 小鼠乳腺癌细胞(4T1) 人乳腺癌细胞(ZR-75-1) 人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)
脑和神经系统
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人胶质瘤细胞(U251MG) 小鼠小胶质细胞(BV2) 人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3) 小鼠颅顶前骨细胞亚克隆(MC3T3-E1 Subclone 14) 人脑星形胶质母细胞瘤(U-87 MG) 大鼠胶质瘤细胞(C6) 小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a) 人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)
血液,淋巴系统
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人B淋巴瘤细胞(Su-DHL-4) 弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY3) 人弥漫大B淋巴瘤细胞(U2932) 人急性非B非T淋巴细胞白血病(Reh) 人慢性髓原白血病细胞(K-562) 人白血病T淋巴细胞(Jurkat, Clone E6-1) 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3) 人单核细胞白血病细胞(THP-1) 猪肺泡巨噬细胞(3D4/21) 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)
泌尿系统
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小鼠前列腺癌细胞(RM-1) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12) 远端肾单位细胞(Distal nephron cell line(JU4s)) 狗肾细胞(MDCK) 人前列腺癌细胞(22RV1) 人胚肾细胞(293T) 人胚肾细胞(HEK293) 人膀胱移行细胞癌细胞(T24) 人膀胱癌细胞(5637) 人膀胱癌细胞(TCCSUP)
消化系统
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人结肠腺癌细胞(LS174T) 猪小肠上皮细胞(IPEC-J2) 人肝癌细胞(HepaRG) 小鼠肝癌细胞(Hepa 1-6) 小鼠肝癌细胞(H22) 人肝癌细胞(SMMC-7721) 人肾癌细胞(ACHN) 非洲绿猴肾细胞(Vero) 人肾透明细胞腺癌细胞(786-0) 人食管鳞癌细胞(KYSE-30) 人食管鳞癌细胞(KYSE-150) 人胃腺癌细胞(AGS) 人胃癌细胞(SGC-7901) 人胃癌细胞(HGC-27) 人肝胆管癌细胞(RBE) 人肝癌细胞(HuH-7) 人肝癌细胞(Hep3B) 人肝癌细胞(Hep G2) 人正常肝细胞(L-02) 人结肠腺癌肺转移细胞(T84) 人结直肠腺癌细胞(Caco-2) 人结直肠腺癌细胞(NCI-H716) 人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1) 小鼠结肠癌细胞(CT26.WT) 小鼠结肠癌细胞(MC38) 人结肠癌细胞(COLO 205) 人结肠腺癌细胞(RKO) 人结肠癌细胞(HT-29) 人结肠癌细胞(SW620) 人结肠癌细胞(SW480) 人结肠癌细胞株(HCT 116)
骨、关节、软组织、 皮肤系统
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小鼠骨样细胞(MLO-Y4) 成釉细胞瘤(hTERT-AM) 小鼠鳞状细胞癌细胞(SCC7) 小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/0-Ag14) 人皮肤鳞癌细胞(A431) 小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10) 人黑色素瘤细胞(M14) 人恶性黑色素瘤细胞(A-375) 人纤维肉瘤(HT-1080) 人骨肉瘤细胞(U-2 OS) 人骨肉瘤细胞(MG-63)
眼耳鼻喉口腔系统
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人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19) 人眼脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1) 人口腔鳞癌细胞(HSC3) 人鼻咽癌细胞(C666-1) 鼻咽癌细胞(CNE2Z) 人鼻咽癌细胞(NPC-43) 大鼠穆勒细胞(rmc-1)
生殖系统
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人卵巢癌细胞(OVCAR-3) 人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo) 人卵巢腺癌细胞(CAOV3) 小鼠睾丸间质细胞(TM3) 小鼠促性腺激素腺瘤细胞(Lbetat2) 人卵巢癌细胞(SK-OV-3) 仓鼠卵巢细胞亚株(CHO-K1) 小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3) 人宫颈癌细胞(HeLa 229) 人宫颈癌细胞(HeLa)
 

基因敲除细胞方案

源井生物根据客户需求,结合靶基因的情况进行基因敲除方案设计。
小片段 敲除方案
gRNA设在外显子两端的内含子中,敲除外显子编码碱基数为非3倍数,敲除后可造成移码。
01
移码敲除方案
gRNA设在外显子上,缺失的碱基数为非3倍数,敲除后可发生移码突变。
02
大片段敲除方案
将整个基因的编码序列敲除,达到大片段敲除的效果。
03
基因敲除细胞方案
查看大图
小片段敲除方案
小片段敲除方案
01
gRNA设在外显子两端的内含子中,敲除外显子编码碱基数为非3倍数,敲除后可造成移码。
移码敲除方案
移码敲除方案
02
gRNA设在外显子上,缺失的碱基数为非3倍数,敲除后可发生移码突变。
大片段敲除方案
大片段敲除方案
03
将整个基因的编码序列敲除,达到大片段敲除的效果。
基因敲除细胞方案 基因敲除细胞方案

服务流程及质量控制

红棉设计敲除方案 RNP复合物 细胞转染
PCR扩增 单克隆制备 pool效率验证
测序验证 质量检测、细胞冻存

FAQs

1 什么是基因敲除?

基因敲除细胞系(Gene Knockout Cell Line)是指在特定细胞中人为删除或失活某个基因,从而使该细胞不再表达该基因编码的蛋白质的细胞系。这种细胞系常用于研究该基因的功能,以及它在细胞生理、生化途径、疾病机制中的作用。常用的方法如CRISPR-Cas9技术:利用Cas9核酸酶在目标基因处产生双链断裂,随后通过非同源末端连接(NHEJ)导致框移突变,使基因失活。

CRISPR-U™ 是源井生物自主研发的高效细胞基因编辑平台,基于 CRISPR/Cas9 技术,结合独特的 gRNA 设计算法、丰富的细胞系编辑参数数据库、精确的 Pool 编辑效率检测方法、单克隆形成率提升策略,以及适用于微量细胞的高通量基因型鉴定体系。在基因敲除细胞系构建方面,源井生物自主研发的 CRISPR-U™ 技术相较于传统方法,可将基因编辑效率提升 10–20 倍。

2 基因敲除与敲低有什么区别?

基因敲除细胞系是通过CRISPR/Cas9等手段永久性删除目标基因,可以实现使其失活;而基因敲低细胞系则通过siRNA或shRNA等方式暂时性或部分抑制基因表达,基因本身仍存在。敲除适用于深入研究基因功能或构建疾病模型,敲低则更适合初步筛选或研究必需基因。两者在稳定性、效率和应用场景上各有优势。

源井生物不仅提供基因敲除细胞系构建服务,还可为您定制高效的基因敲低 解决方案。无论您的研究目标是基因功能验证、机制探索,还是疾病模型构建,源井生物都能为您提供可靠、高效的基因编辑解决方案。

3 基因敲除服务多少钱?

源井生物已构建5000+现货基因敲除(KO)细胞系,特惠价低至¥4980!交付快至1周左右。如未找到目标细胞株,我们还可提供定制化基因敲除服务,满足个性化科研需求。敲除细胞系服务提供PCR检测及Sanger测序验证,确保基因编辑的准确性。如有特殊验证需求(如Western Blot蛋白水平验证),可根据具体项目进行评估并提供相应服务,点击在线咨询>>>

KO引用文献精选

Hep G2细胞敲除PPP1R12B/KCNJ12/FGA基因——肝细胞癌
IF=64.8
Nature
Hep G2细胞敲除PPP1R12B/KCNJ12/FGA基因——肝细胞癌
IF=64.8 Nature
 
摘要:
该研究完成了中国人群肝细胞癌全基因组深度特征分析,还选取了3个新鉴定的潜在驱动事件进行详细功能验证,发现上述基因的突变足以导致基因表达水平的显著变化(其中PPP1R12B,KCNJ12,FGA基因敲除细胞和携带突变位点的过表达慢病毒均由源井生物构建),并参与调控肝细胞癌的多种恶性表型,这些结果证实基于数据分析发现的新驱动事件的有效性。 查看详情>>
候选驱动基因景观
候选驱动基因景观
HeLa细胞系敲除STING1基因——病毒防治
IF=32.4
Immunity
HeLa细胞系敲除STING1基因——病毒防治
IF=32.4 Immunity
 
摘要:
为了深入研究cGAS活性调节机制对于预防和治疗病毒性疾病的作用,山东大学赵伟[1]教授课题组采用源井生物构建的敲除STING1基因的HeLa细胞 系作为关键模型,发现DNA的两种构象(B-DNA及Z-DNA)与cGAS亲和力不同;内源性代谢小分子精胺和亚精胺及多胺分解代谢关键酶SAT1通过诱导DNA构象转换调节cGAS活性。该研究揭示了一种防止细胞DNA异常识别的新机制,并为治疗cGAS活性异常相关疾病提供了治疗靶点。 查看详情>>
多胺代谢通过控制Z-DNA形成调节cGAS活性模式图
多胺代谢通过控制Z-DNA形成调节cGAS活性模式图
HCT116细胞系敲除TP53基因——细胞凋亡
IF=16.6
Nature Communications
HCT116细胞系敲除TP53基因——细胞凋亡
IF=16.6 Nature Communications
 
摘要:
该研究采用源井生物构建的敲除TP53基因的HCT116细胞系,通过解析p53与抗凋亡蛋白BCL-2的复合物晶体结构,并结合生化与细胞实验,揭示了p53与BCL-2蛋白相互作用并促进细胞凋亡的新机制,即p53通过直接占据BCL-2的BH3结合口袋与之形成复合物,并通过释放位于口袋的促凋亡BCL-2家族蛋白来拮抗BCL-2活性,从而促进细胞凋亡 [2]。这些结构和功能数据为进一步了解p53介导的线粒体凋亡的复杂调控机制提供了新的思路,也为研发靶向蛋白质间相互作用激活细胞凋亡的抗癌治疗策略提供了重要基础。 查看详情>>
p53与BCL-2相互作用的突变会降低细胞凋亡
p53与BCL-2相互作用的突变会降低细胞凋亡
U2OS细胞敲除ZNF432基因——卵巢癌耐药
IF=14.9
Nucleic Acids Research
U2OS细胞敲除ZNF432基因——卵巢癌耐药
IF=14.9 Nucleic Acids Research
 
摘要:
ZNF蛋白被证实为调节哺乳动物细胞基因组完整性的关键因子,为探究ZFP可作为基于同源重组(HR)的DNA修复效应器的可能性,拉瓦尔大学Jean-Yves Masson[3] 团队采用源井构建的U2OS敲除ZNF432细胞系进行了一系列实验,发现ZNF432在癌细胞中缺失会加速DNA修复,导致PARPi作用减弱,使卵巢癌细胞产生耐药性,证实ZNF432是一种新的HR抑制因子,成功拓宽了研究PARPi疗效的新途径。 查看详情>>
调控ZNF432表达量影响卵巢癌细胞耐药性
调控ZNF432表达量影响卵巢癌细胞耐药性
Hep G2细胞敲除SNORD17基因——肝细胞癌
IF=12.4
Cell death & differentiation
Hep G2细胞敲除SNORD17基因——肝细胞癌
IF=12.4 Cell death & differentiation
 
摘要:
该研究构揭示了小核仁RNA SNORD17和p53信号通路在肝细胞癌的中的调控作用,为肝细胞癌的治疗提供了一个新的潜在靶点[5] 。源井生物为本研究提供关键细胞模型:SNORD17基因敲除的Hep G2细胞,通过体外和体内实验表明,在HCC细胞系敲除SNORD17基因可显著抑制细胞增殖、克隆形成和G1/S期转变。 查看详情>>
p53介导SNORD17对HCC细胞生长的影响
p53介导SNORD17对HCC细胞生长的影响
RAW264.7细胞敲除Pik3r1——骨质疏松
IF=11.4
Redox Biology
RAW264.7细胞敲除Pik3r1——骨质疏松
IF=11.4 Redox Biology
 
摘要:
该文章通过源井生物构建的Pik3r1基因RAW264.7细胞敲除模型 ,结合大量的体内外实验探索了GSTP1重塑破骨细胞相关骨稳态的一种全新机制,第一次诠释了破骨细胞的细胞命运是由GSTP1介导的氧化还原相关的翻译后修饰-自噬流级联轴来决定的[4]查看详情>>
SiNPs诱导CASA机制图解
GSTP1 介导的Pik3r1谷胱甘肽化调节破骨细胞生成

*源井生物交付的所有实验成果及产物仅限于科研使用,不可适用于诊断、治疗、临床及其它用途。

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