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细胞增殖Cell Proliferation
细胞增殖(proliferation)是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。
技术原理
正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1和WST-8等 )还原为紫色结晶状物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态。
Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒,可用于简便而准确的细胞增殖分析。
其基本原理为:该试剂盒中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。细胞增殖越多越快,则颜色越深。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞 数目呈线性关系。
结果示例

参考文献
A. Deng, Danni et al. “p62 acts as an oncogene and is targeted by miR-124-3p in glioma.” Cancer cell international vol. 19 280. 6 Nov. 2019, doi:10.1186/s12935-019-1004-x

服务周期及结果

服务周期

约5-10个工作日,需根据细胞生长情况及实验设计而定;

客户提供

细胞株及实验条件参数设置

结果交付

原始数据、分析结果、实验报告

检测细胞增殖的其他方法
原理 特点
BrdU法 BrdU可代替胸腺嘧啶核苷插入复制的DNA双链中,用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量从而判断细胞的增殖能力 直接测定DNA合成;可同时结合其他标记物,双重染色,判断增殖细胞的种类
Ki-67法 Ki-67 主要表达于细胞分裂的各个时期G1、S、G2 和 M 期,但G0 期不表达,因此可用于检测细胞的生长指数 成像结果可直观反映增殖细胞的空间分布;可获得药物的刺激效应或抗增殖效应等
活细胞
计数法
利用台盼蓝无法透过活细胞完整的细胞膜而不着色,但能透过死细胞,从而计数活细胞检测细胞增殖能力 检测方法简单,直接计数;不适合评估特定亚群和数量较多的细胞
克隆形成法 细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞的贴壁成活及形成克隆的数量,反映细胞的群体依赖性和增殖能力 适用于贴壁和非锚定依赖性生长的细胞

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