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首页 > 技术服务 > CRISPR-U™ 基因编辑细胞 > iPSC技术服务 > iPSC基因编辑
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  • CRISPR-U™基因编辑细胞
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    iPSC精准基因编辑技术概述

    源井生物的iPSC基因编辑技术是通过基于CRISPR/Cas9体系的基因编辑技术，对iPSCs进行基因敲除、敲入、修复或点突变等编辑操作，可应用于疾病模型构建、基因治疗，以及病理学和发育生物学的机制研究。源井生物提供全方位的基因编辑服务，具备自主研发的CRISPR-U™和EZ-HRex™等基因编辑技术平台和优势，确保编辑结果的准确性和稳定性。

    源井独家优势

    CRIPSR-U™专利技术
    高效基因编辑，阳性率提升10-20倍。
    EZ-editor™单克隆鉴定技术
    高通量阳性克隆筛选，大幅缩短构建周期。
    干细胞培养体系
    独家体系，优化细胞状态，确保细胞干性。
    丰富案例
    超300种细胞, 6000个项目成功案例。

    iPSC基因编辑服务
    300+干细胞成功案例
    包含干性检测报告

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    我们提供一系列基因编辑服务，帮助您精准实现iPSC细胞株的基因编辑，进行相关的遗传研究和疾病模型开发：
    基因点突变
    EZ-HRex™技术
    HDR效率高达84%
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    基因敲除
    CRISPR-U™技术
    编辑效率提升10-20倍
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    稳转
    EZ-OE™技术
    高效率，表达稳定
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    技术流程与服务承诺

    细胞类型 iPS、H1、H9等
    服务类型 基因敲除/点突变/敲入
    周期 快至12周
    交付 纯合克隆
    价格   在线咨询>>
    细胞类型
    iPS、H1、H9等
    周期
    快至12周
    服务类型
    基因敲除/点突变/敲入
    交付
    纯合克隆
    咨询价格
    iPS细胞数据展示
    1. iPS细胞形态
    iPS细胞
    iPS单克隆
    iPS细胞
    iPS单克隆
    2. iPS细胞转染效率
    iPS细胞电转效率
    iPS细胞感染效率
    3. iPS细胞干性检测
    3.1 表面标志物
    表面标志物
    3.2 多能基因检测
    多能基因检测
    3.3 畸胎瘤形成实验
    从左往右分别为：外胚层（神经花环），中胚层（软骨组织），内胚层（原肠上皮）
    3.1 表面标志物
    表面标志物
    3.2 多能基因检测
    多能基因检测
    3.3 畸胎瘤形成实验
    从左往右分别为：外胚层（神经花环），中胚层（软骨组织）， 内胚层（原肠上皮）

    iPSC基因编辑技术的应用领域

    病理机制研究与药效评估
    利用基因编辑技术在iPSCs引入致病突变或病理遗传特性，模拟疾病表型，可用于病理机制的探索与高通量药物筛选。
    组织器官的再生与修复
    iPSCs具有分化为功能性细胞（如胰岛β细胞、多巴胺神经元、视网膜细胞等）的潜能，可用于修复相对应的组织损伤。
    发育生物学基础研究
    iPSCs可模拟人体早期胚胎发育过程，结合基因编辑技术，可应用于相关基因在人体特定发育过程中的功能和机制研究。
    个性化细胞治疗
    利用基因编辑技术在iPSCs引入致病突变或病理遗传特性，模拟疾病表型，可用于病理机制的探索与高通量药物筛选。
    病理机制研究与药效评估
    利用基因编辑对hiPS细胞的HLA等基因进行工程化改造，生成“通用型”CAR-T细胞，降低免疫排斥，用于癌症治疗。

    案例分享

    目前，CRISPR基因编辑与iPS联合用于疾病模型构建和细胞治疗的案例已经有很多了，包括神经退行性疾病、代谢性疾病和心脏遗传病等，以下表格汇总了往年的一些相关研究。

    表1：CRISPR基因编辑与iPS结合研究案例
    基因编辑方法 疾病名称 突变基因 疾病模型研究 细胞治疗应用
    CRISPR-KO构建疾病模型 免疫缺陷，着丝粒的不稳定，和面部异常（ICF）综合征 DNMT3B √
    显性营养不良性大疱表皮松解症(DDEB) COL7A1 √
    丹吉尔病（TD） ABCA1 √
    心房颤动(AF) KCNA5 √
    CRISPR-KO恢复正常功能 脆性X综合征(FXS) FMR1 √
    杜氏肌营养不良(DMD) dystrophin √ √
    CRISPR-KI同源重组基因矫正 进行性骨化性肌炎(FOP) ALK-2 √
    慢性肉芽肿性疾病(CGD) CYBB √ √
    肌萎缩侧索硬化症(ALS) SOD1 and FUS √
    额颞叶痴呆 CHMP2B √
    无β脂蛋白血症 MTTP √
    肥厚性心肌病(HCM) PRKAG2 √
    CRISPR与piggyBAC结合 β地中海贫血 HBB √ √
    布鲁格达氏综合症 SCN5A √
    亨廷顿病（HD） HTT √
    遗传性运动感觉神经病(HMSN) TFG √
    四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症 PTPS and DHPR √
    HIV CCR5 √ √
    真性红细胞增多症(PV)和α1-抗胰蛋白酶(AA T)缺乏症 JAK2-V617F和SERPINA1 √
    CRISPRi抑制基因表达 长QT综合征（LQTS） CALM2 √

    iPSC基因编辑过程状况百出？这些实践中屡试不爽的方法分享给你! >>

    疾病建模：常染色体显性多囊肾病iPS模型构建

    常染色体显性多囊肾病 (ADPKD) 是最常见的遗传性肾病，发病率大约为1/400人-1/1000人。常染色体显性多囊肾和两个基因缺陷有关，其中85％的患者是由位于16号染色体的基因PKD1（TRPP1）发生突变所致。Romano等通过使用CRISPR-Cas9技术在PKD1基因中产生了杂合敲除与纯合敲除的等基因iPS细胞系。并验证了敲除后的iPS细胞在三个胚层中保持干细胞样形态、正常核型、多能性和分化能力。可以作为研究 ADPKD致病机制以及药物筛选的模型资源。

    疾病建模：常染色体显性多囊肾病iPS模型构建
    基因矫正：患者iPS基因矫正后恢复了β-珠蛋白(HBB)表达

    β-地中海贫血是一种单基因疾病，由β-珠蛋白 ( HBB ) 基因点突变或片段缺失导致正常β珠蛋白肽链缺失或合成量不足引起的。β-地中海贫血携带者在中国南方的患病率为 2.54%，目前造血干细胞移植是重度β-地中海贫血患者唯一可用的根治性治疗方法。然而，造血干细胞移植受限于大多数患者缺乏HLA匹配的健康供体。研究人员通过CRISPR/Cas9系统对患者来源的iPS细胞（基因型为homozygous 41/42 deletion）进行基因编辑，主要设计了靶向HBB突变位置的gRNA，同时以包含正常序列（WT）的PCR产物作为Donor模板进行重组，筛选到基因矫正成功的细胞。将矫正成功的iPS细胞重新分化为造血干细胞HSCs，最终发现移植了矫正iPS后的NSI免疫缺陷鼠体内可以正常造血，并产生正常的HBB蛋白，这项研究为β-地中海贫血的治疗带来新的希望。

    基因矫正：患者iPS基因矫正后恢复了β-珠蛋白(HBB)表达
    抗病毒治疗：iPS及其衍生血细胞敲除CCR5后具有HIV抗性

    趋化因子受体5（CCR5）作为HIV病毒的共同受体，对于CCR5嗜性病毒的细胞感染至关重要，研究表明，CCR5功能性丧失可防止HIV感染。通过对病人体内的免疫细胞进行基因编辑，有望对HIV感染的患者进行治疗，但由于免疫细胞转染效率低，培养及扩增难度较大，难以直接对其进行基因编辑。Kang等通过使用CRISPR/Cas9技术，在iPS上进行了基因编辑，分别设计靶向CCR5的单gRNA敲除方案和双gRNA敲除方案，成功筛选到CCR5敲除纯合克隆。纯合CCR5突变的iPS细胞系仍然显示出多能干细胞的典型特性，并有效分化为造血细胞，巨噬细胞，体外HIV感染实验表明其对CCR5嗜性病毒的攻击产生了独特的抗性。这项研究表明将iPS技术与CRISPR/Cas9技术结合，在HIV感染的治疗中有应用前景。

    抗病毒治疗：iPS及其衍生血细胞敲除CCR5后具有HIV抗性
    *源井生物交付的所有实验成果及产物仅限于科研使用，不可适用于诊断、治疗、临床及其它用途。

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