人肺鳞癌细胞(SK-MES-1-CAS9)
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人肺鳞癌细胞(SK-MES-1-CAS9)
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Cas9稳转株细胞是指通过基因工程手段将Cas9核酸酶基因稳定整合至宿主细胞基因组中，使细胞长期、稳定表达Cas9蛋白的细胞系，是开展CRISPR基因敲除、文库筛选和功能基因组学研究的基础工具细胞。源井生物已构建100余株常见细胞系的Cas9稳转株，仅需转染gRNA即可快速实现基因敲除；共转染gRNA与供体DNA，即可完成基因敲入或点突变。源井生物SK-MES-1-CAS9细胞株是采用慢病毒法构建，并通过抗生素筛选获得持续稳定高表达的细胞 。SK-MES-1-CAS9细胞株已进行功能性编辑验证，验证结果显示导入靶基因gRNA后可产生高效DNA切割和indel，适用于在SK-MES-1细胞中进行基因敲除、gRNA效率验证或CRISPR文库高通量筛选等实验。
质粒图谱
点击放大产品概述
人肺鳞癌细胞(SK-MES-1-CAS9)
产品名称
人肺鳞癌细胞(SK-MES-1-CAS9)
表达基因
Cas9
产品货号
YC-C019-Cas9-H
抗体基因
hygro
产品分类
Cas9细胞系
支原体检测
阴性
物种
Human
培养体系
89%MEM+10%FBS+1% NEAA
细胞形态
上皮样, 贴壁细胞
储存条件
液氮
发货形式
活细胞：常温运输
冻存管：干冰运输
冻存管：干冰运输
应用说明
本产品仅供进一步科研使用，不得用于诊断治疗、临床及其他用途。
传代比例
1:3~1:4
收录情况
-
背景描述
SK-MES-1是从一名65岁白人男性鳞状细胞癌患者的肺中分离出来的具有上皮形态的细胞系。这种产品在癌症研究中有应用。该细胞系由从一个患肺部鳞癌的病人胸水中分离培养。
产品优势
使用简单
该类细胞株稳定表达Cas9蛋白，仅需转染gRNA，即可实现基因敲除，而同时转染gRNA和供体DNA，则可实现基因敲入/点突变。
高效敲除
在该类细胞的基础上已成功构建大量基因敲除细胞株，且基因敲除效率均提高5-10倍。
精选细胞
该类细胞株经过优化，代次低、活性高、状态好，适用于各类基因编辑实验。
质量控制规范
1. 细菌和真菌检测
检测结果为阴性
2. 支原体检测
检测结果为阴性
3. STR鉴定
下载STR报告4. Cas9稳转细胞验证数据
2) 切割验证
注：上图为在SK-MES-1-CAS9稳转细胞株上，电转靶向KMT2D基因的gRNA质粒，药筛48h后取pool细胞检测的测序峰图。红色箭头标示处为套峰出现的位置，显示靶位点由于发生了切割而导致基因型明显改变，说明Cas9核酸酶成功表达。
图1. Cas9稳转细胞株切割功能验证
注意事项
1) 该细胞株已稳定表达Cas9核酸酶，仅需转染gRNA，即可实现基因敲除，而转染gRNA和供体DNA，则可实现基因敲入/点突变。
2) 转染的gRNA可以是质粒，也可以是合成的或体外转录的sgRNA，转染方法可以选择瞬转（如：脂质体法、电转法），也可以选择稳转（如：慢病毒法）。
3) 细胞系在体外长期培养可能导致部分细胞基因组发生改变，不排除部分改变会降低Cas9的表达。因此，建议使用低代次（10代以内）的细胞进行实验，效果更加。
拆箱和存放说明
1.
细胞接收
2.
细胞处理
细胞复苏、传代及冻存流程概述参考
1.
细胞复苏
2.
细胞传代
3.
细胞冻存
参考文献
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