人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo-CAS9)
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Cas9稳转株细胞是指通过基因工程手段将Cas9核酸酶基因稳定整合至宿主细胞基因组中，使细胞长期、稳定表达Cas9蛋白的细胞系，是开展CRISPR基因敲除、文库筛选和功能基因组学研究的基础工具细胞。源井生物已构建100余株常见细胞系的Cas9稳转株，仅需转染gRNA即可快速实现基因敲除；共转染gRNA与供体DNA，即可完成基因敲入或点突变。源井生物HTR-8/SVneo-CAS9细胞株是采用慢病毒法构建，并通过抗生素筛选获得持续稳定高表达的细胞 。HTR-8/SVneo-CAS9细胞株已进行功能性编辑验证，验证结果显示导入靶基因gRNA后可产生高效DNA切割和indel，适用于在HTR-8/SVneo细胞中进行基因敲除、gRNA效率验证或CRISPR文库高通量筛选等实验。
质粒图谱
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冻存管：干冰运输
用编码猿猴病毒SV40大T抗原的基因转染人类妊娠早期胎盘绒毛外植体中生长出来的细胞，从而获得到永生化的人胎盘绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo。这些细胞表现出各种具有滋养细胞特征的标记物：胰岛素样生长因子（IGF）-II、NDOG-5、增殖细胞核抗原（PCNA）、人类白细胞抗原框架抗原（W6/32）和一组独特的整合素，包括a1、a3、a5、av和b1亚基以及avb3/b5维管束素受体。据报道，该细胞巨噬细胞标志物63/D3、内皮细胞标志物VIII和a6和b4整合素亚单位表达阴性。该细胞可用于滋养细胞和胎盘的功能研究。
产品优势
质量控制规范
| Sample Name | Target Name | Cт Mean | ΔCт |
|---|---|---|---|
| HTR-8/SVneo-CAS9 | Cas9 | 15.16261578 | 2.50003052 |
| HTR-8/SVneo-CAS9 | β-actin | 12.66258526 | |
| HTR-8/SVneo | Cas9 | 33.88836288 | 20.42957973 |
| HTR-8/SVneo | β-actin | 13.45878315 |
注：上图为在HTR-8/SVneo-CAS9稳转细胞株上，电转靶向GSDMB基因的gRNA质粒，药筛48h后取pool细胞检测的测序峰图。红色箭头标示处为套峰出现的位置，显示靶位点由于发生了切割而导致基因型明显改变，说明Cas9核酸酶成功表达。
拆箱和存放说明
细胞复苏、传代及冻存流程概述参考
参考文献
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