【文献解读】二甲双胍激活TFEB诱导自噬,TFEB成治疗NAFLD的新靶点!

让基因编辑更简单
欢迎 : 退出
注册 | 登录
400-688-9033

当前位置:首页 > 技术专题 > 【文献解读】二甲双胍激活TFEB诱导自噬,TFEB成治疗NAFLD的新靶点!

发布日期:2022年01月06日
浏览量: --

【文献解读】二甲双胍激活TFEB诱导自噬,TFEB成治疗NAFLD的新靶点!

转录因子EB (TFEB)

 

背景

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种主要的肝脏疾病亚型,肝脏脂质过度积累为特征,涵盖多种肝脏疾病,包括脂肪变性、脂肪性肝炎、纤维变性和肝硬化。二甲双胍常用来治疗型糖尿病,近年来发现二甲双胍对于改善NAFLD有潜在作用。转录因子EB (TFEB)是溶酶体发生和自噬的主要转录调节因子,激活后可有效应对脂质代谢紊乱脂质代谢中起到关键作用。然而TFEB是否参与二甲双胍对抗NAFLD的保护作用尚未见报道。

针对这个问题,来自昆明医科大学第一附属医院的Dan Zhan等学者在Frontiers in Pharmacology上发表了名为“Metformin Alleviates Hepatic Steatosis and Insulin Resistance in a Mouse Model of High-Fat DietInduced Nonalcoholic Fatty Liver Disease by Promoting Transcription Factor EB-Dependent Autophagy”的文章。在这篇报道中,研究人员通过在五组的小鼠身上(对照组、高脂肪饮食喂养(HFD)组、HFD + 二甲双胍 (Met)组、HFD + Met + Scramble对照组、HFD + Met + TFEB shRNA组)进行实验,证明了高脂肪饮食喂养的小鼠肝脏中TFEB的活性降低。二甲双胍治疗显著逆转TFEB活性,二甲双改善肝脂肪变性和胰岛素抵抗的作用依赖于TFEB他们发现二甲双胍诱导的自噬受到TFEB的调控,这一发现揭示了TFEB作为一种中介体,将二甲双胍与自噬联系起来改善NAFLD,并强调了TFEB可能是治疗NAFLD一个有前景的分子靶点。

文献标题

 

二甲双胍诱导NAFLD小鼠肝脏中的自噬

二甲双胍治疗可以显著改善高脂饮食小鼠的过度脂质积累、肝脏脂肪变性和IR。而自噬失调可能是NAFLD发病原因之一。因此,研究人员假设二甲双胍可能通过激活自噬来减少肥胖、肝脏脂肪变性和IR。为了验证自噬在肝脏中的激活,研究人员通过Western blotting检测自噬蛋白Atg7LC3B-II以及自噬底物p62/SQSTM1的水平。结果表明,二甲双胍可促进HFD诱导的NAFLD小鼠肝脏中的自噬(图1

 二甲双胍可促进HFD诱导的NAFLD小鼠肝脏中的自噬

1

 

二甲双胍在NAFLD小鼠肝脏内通过激活TFEB诱导自噬

TFEB是自噬和溶酶体发生的主要调节因子。TFEB的活性主要取决于其磷酸化状态和胞核穿梭,而核易位TFEB激活的标志。首先,研究人员使用Western blotting检测二甲双胍是否激活TFEB,结果显示二甲双胍处理导致TFEB核内积累增加(2A)TEFB磷酸化减少。然后,为了进一步检测TFEB是否参与二甲双胍诱导的自噬,研究人员通过尾静脉注射表达一种针对TFEB (shTFEB)shRNAAAV8病毒(Ubigene提供)抑制TFEB。与注射干扰对照shRNA相比,注射了重组AAV8-shRNA-TFEB可降低TFEB及其靶基因的表达。Western blotting结果显示,TFEB下调LC3B-II的表达,上调p62/SQSTM1的蛋白表达(2C)。同样,TFEB水平下调也不会影响Atg7蛋白水平。综上所述,这些结果证实二甲双胍通过激活TFEB诱导自噬。

源井在该研究中构建了shRNA载体并进行腺相关病毒包装,得到重组AAV8-shRNA-TFEB和对照用于研究TFEB是否参与二甲双胍诱导的自噬源井生物提供的腺相关病毒颗粒经过超速离心纯化,并通过qPCR对病毒基因拷贝进行滴定,滴度在10^12~10^13GC/ml,轻松满足各类动物实验的使用要求。欢迎点击了解 >> 

二甲双胍在NAFLD小鼠肝脏内通过激活TFEB诱导自噬

2

 

二甲双胍通过TFEB改善HFD喂养小鼠的过度脂质积累和IR

为了检测TFEB介导的自噬激活是否参与了HFD喂养小鼠的过度脂质积累和IR的缓解,他们在TFEB下调后使用H&E染色和油红O脂肪染色法测量了肝脏脂肪变性水平(3)。结果表明,二甲双胍对HFD喂养诱导的NAFLD小鼠的过度脂质积累和IR改善作用严重依赖于TFEB

二甲双胍通过TFEB改善HFD喂养小鼠的过度脂质积累和IR

3

 

综上所述,本研究揭示了二甲双胍改善NAFLD的一种新的分子机制,并突出了TFEB治疗NAFLD的潜在有利作用。

 

源井生物是一家专注于细胞基因编辑的企业,可在全球范围内提供优质的基因编辑细胞、稳转细胞株、病毒包装等相关服务,以及近2000种KO细胞现货库,基因敲除试剂盒等基因编辑相关产品,了解更多详情欢迎咨询我们!

 

相关产品推荐

相关服务推荐

联系我们