细胞不惧转染,单克隆也能肆意生长!
细胞培养难在哪?
细胞培养是每一个细胞人的必修课,通过体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能。这是一个看似简单,实际上却常常让人头疼的一个过程,比如本该贴壁的细胞不贴壁,希望它悬浮的却悄悄聚团了,甚至一个不小心细胞就死了……更何况有些实验对细胞的状态要求更高,比如细胞转染实验,其中的电穿孔、病毒感染、抗生素筛选等过程中都会使细胞受到额外损伤,导致细胞容易死亡,从而降低转染效率。尤其在涉及基因编辑细胞时,细胞转染后状态变差,单克隆形成率低,生长时间长等都加大了实验难度。因此构建一个能够快速恢复与优化细胞状态的培养体系对于转染相关的基因功能研究是至关重要的。
怎样的培养基才能适用于基因编辑?
如何构建一个适用于各类基因编辑实验,又要考虑到不同细胞特点的培养体系呢?源井生物的专家团队选择从细胞转染和单克隆生长入手,因为转染和单克隆生长是大多数基因编辑实验的关键步骤,也是基因编辑实验中对细胞状态最具考验的环节。源井生物不仅对培养基中各成分配比进行了精细化的测试优化;还对血清进行高标准的筛选,包括不同采血时间、不同等级、不同来源、不同处理以及不同批次;另外有些细胞还需考虑加入添加剂,确保细胞具备极佳的状态迎接各种“挑战”。目前,源井生物专家团队已经针对细胞转染和单克隆培养两大关键过程对培养体系的高要求,创新研发了两款培养基(共覆盖70余种常见细胞系):转染专用培养基(专用于细胞转染)和单克隆生长培养基(现在两款培养基限时8.5折,点击了解活动详情 >
其中转染专用培养基是源井生物针对细胞转染环节所特殊优化的细胞培养基,不仅可以在细胞受到转染药筛等刺激损伤后,加快细胞修复速度,还可以显著提高细胞的转染效率。以下为MDA-MB-231普通培养和转染专用培养基转染对比图例(图1)。
图 1
注:A和B为MDA-MB-231细胞用普通培养基培养时感染病毒后细胞状态和感染率,C和D为MDA-MB-231细胞用源井生物转染专用培养基培养时感染后的细胞状态和感染率。
而单克隆生长培养基适用于基因编辑实验中单细胞的培养,对于常规可以形成单克隆的细胞,可以显著提高单克隆形成率,实现单克隆形成从少到多,而对于难以形成单克隆的细胞,可以实现单克隆的从无到有,大大提高了基因编辑的单克隆形成率。下表展现了不同细胞类型使用源井单克隆生长培养基的克隆形成率对比(表1)。
表1-各种细胞在不同培养基中的单克隆形成率
细胞名称 | 细胞中文名称 | 形态 | 单克隆形成等级 | 常规培养基 | EZ-editor™单克隆生长 |
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SK-N-SH | 人神经母细胞瘤细胞 | 上皮样 | 难 | <1% | 20-30% |
Huh-7 | 人肝癌细胞 | 上皮样 | 难 | 1-5% | 15-25% |
Hep G2 | 人肝癌细胞 | 上皮样 | 难 | 4-8% | 20-30% |
22RV1 | 人前列腺癌细胞 | 上皮样 | 难 | 8-12% | 20-30% |
MDA-MB-231 | 人乳腺癌细胞 | 上皮样 | 中 | 8-12% | 25-35% |
THP-1 | 人单核细胞 | 悬浮细胞 | 中 | 15-19% | 25-35% |
HEK293 | 人胚肾细胞 | 上皮样 | 易 | 16-20% | 32-38% |
上述的这两种培养基,属于源井生物全新研发的EZ-editor™基因编辑系列产品。秉承着“让基因编辑更简单!”的初心,EZ-editor™基因编辑系列产品全面覆盖了整个基因编辑实验流程,能够有效解决实验难点,每一种产品是为了提高基因编辑效率而研发的。如果您想了解更多EZ-editor™基因编辑系列产品的信息,欢迎点击进入我们的官方产品页 >